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用这个方法操作小鼠elisa试剂盒,既简单又快速

发布时间:2020-12-18 点击量:51
  小鼠elisa试剂盒具有高效、快捷、易批量操作等优点,不同的厂家提供不同种类,不同类型的elisa试剂盒产品,为科研用户带来方便。小鼠elisa试剂盒能够针对特定检测源,制备特异性抗原抗体,根据应用需要量身定制检测试剂盒,有效控制检测试剂成本。
 
  小鼠elisa试剂盒的组成:
  1、结合物及标本的稀释液;
  2、洗涤液,在板式elisa中,常用的稀释液为含0.05%吐温20磷酸缓冲盐水;
  3、酶标记的抗原或抗体;
  4、酶的底物;
  5、阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),elisa试剂盒参考标准品和控制血清;
  6、已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂)。
 
  操作步骤:
  1、使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差;
  2、根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内;
  3、加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时;
  4、甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次;
  5、每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟;
  6、甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次;
  7、每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照;
  8、取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果;
  9、在450nm波长处测定各孔的OD值。