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分析国产ELISA试剂盒的样本处理及要求

发布时间:2021-03-24 点击量:160
  国产ELISA试剂盒是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中。
 
  组成:
  1、结合物及标本的稀释液;
  2、洗涤液,在板式ELISA中,常用的稀释液为含0.05%吐温20磷酸缓冲盐水;
  3、酶标记的抗原或抗体;
  4、酶的底物;
  5、阴性对照品和阳性对照品,elisa试剂盒参考标准品和控制血清;
  6、已包被抗原或抗体的固相载体。
 
  国产ELISA试剂盒的样本处理及要求:
  1、血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
  2、血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
  3、尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
  4、细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
  5、组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
  6、标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
  7、不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。