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ELISA试剂盒在样本处理上有什么特殊要求?

发布时间:2021-06-24 点击量:110
  ELISA试剂盒具有高效、快捷、易批量操作等优点,不同的厂家提供不同种类,不同类型的ELISA试剂盒产品,为科研用户带来方便。
 
  适用领域:
  1、免疫酶染色各种细胞内成份的定位;
  2、研究抗酶抗体的合成;
  3、显现微量的免疫沉淀反应;
  4、定量检测体液中抗原或抗体成份。
 
  ELISA试剂盒的性能:
  1、灵敏度:最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990;
  2、特异性:不与其它细胞因子反应;
  3、重复性:板内、板间变异系数均小于10%。
 
  ELISA试剂盒的样本处理及要求:
  1、血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心;
  2、血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心;
  3、尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行;
  4、细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心;
  5、组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用;
  6、标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融;
  7、不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。