小鼠elisa试剂盒在实验前的准备工作

　　小鼠elisa试剂盒是一种敏感性高，特异性强，重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存，操作简便，结果判断较客观等因素，已广泛应用在免疫学检验的各领域中。

　　

　　小鼠elisa试剂盒的实验原理：

　　将目标抗体包被于96孔微孔板中，制成固相载体，向微孔中分别加入标准品或标本，其中的目标连接于固相载体上的抗体结合，然后加入微生物化的目标抗体，将未结合的生物素抗体洗净后，加入HRP标记和亲和素，再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的目标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（O.D.值），计算样品浓度。

　　实验前的准备工作：

　　1、准备好所有实验额外所需物品，如试管 吸头 移液器 离心机等；

　　2、确定试剂盒在有效期内；

　　3、仔细阅读说明书；

　　4、按说明书确定所有试剂齐全（数量 体积）；

　　5、标本制备要规范，每份标本体积要按2-3个复孔以上的量制备（贮存），尽量分装做备份；

　　6、根据检测标本数量确定所需试剂的量；

　　7、按说明书将所用试剂盒平衡至室温，配制所需试剂。

　　

　　小鼠elisa试剂盒注意事项：

　　1、试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存；

　　2、浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果；

　　3、各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使排枪加样；

　　4、请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高，请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计3算时请后乘以总稀释倍数（×n×5）。

　　5、封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

　　6、底物请避光保存。

　　7、严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准。

　　8、所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

　　9、本试剂不同批号组分不得混用。

　　10、如与英文说明书有异，以英文说明书为准。