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酶联免疫试剂盒是如何正确处理标本的?

发布时间:2021-05-27 点击量:109
  酶联免疫试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA)已知浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中的浓度呈比例关系。
 
  适用领域:
  1、免疫酶染色各种细胞内成份的定位。
  2、研究抗酶抗体的合成。
  3、显现微量的免疫沉淀反应。
  4、定量检测体液中抗原或抗体成份。
 
  酶联免疫试剂盒的标本处理:
  1、实验前应预测标本含量,如果标本浓度过高,应对标本进行稀释,使稀释后的标本符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。标本使用0.01mol/L的PBS稀释(PH=7.0-7.2);
  2、若所检样本不包含在说明书所列样本之中,建议进行预实验验证其有效性,并注意留存样本;
  3、使用化学裂解液制备的组织匀浆或细胞提取液可能会由于某些化学物质的引入导致ELISA实验结果偏差;
  4、若样本为细胞培养上清,因该类样本干扰因素较多,如:细胞状态、细胞数量、采样时间等,所以可能存在检测不出的情况;
  5、某些天然蛋白或重组蛋白,包括原核及真核重组蛋白,可能因为与本产品所使用的检测抗体及捕获抗体不匹配,而不被检测出;
  6、建议使用新鲜样本,保存时间过长可能会存在蛋白降解或变性导致实验结果偏差。